摘要:本實驗以生姜為原料，利用酶提法研究加酶量、酶解時間、料液比對生姜多糖得率的影響，通過分析響應曲面并優化提取工藝參數，采用Sevag法對生姜多糖純化，并對其組成成分進行分析。實驗結果表明，加酶量、酶解時間、料液比三個因素對生姜得率的影響大小依次為酶解時間 ＞ 料液比 ＞ 加酶量；最佳工藝條件為料液比1 : 30、酶解時間80 min、加酶量3 %，此時多糖得率為15.13 %；生姜粗多糖的純度為50.11 %，經脫蛋白后，生姜多糖純度提高了40.15 %，多糖的純度達到了70.23 %；通過薄層色譜法，確定了最佳水解酸為濃硫酸，最佳展層系統為水、醋酸、異丙醇、正丁醇、乙酸乙酯按6 : 7 : 12 : 7 : 20，生姜多糖是由D-半乳糖、D-甘露糖、果糖和葡萄糖組成的。

關鍵詞生姜；纖維素酶；多糖；分離純化；響應曲面；薄層層析

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

 1.1生姜概況-1

1.1.1生姜的簡介-1

1.1.2生姜的營養學價值-1

1.1.3生姜的藥用學價值-1

 1.2多糖的研究進展-1

1.2.1植物多糖的定義-1

1.2.2植物多糖的分類-2

1.2.3多糖的功能-2

 1.2.3.1免疫調節能力-2

 1.2.3.2抗氧化能力-2

 1.2.3.4抗腫瘤作用-2

 1.2.3.5降血糖能力-2

 1.2.3.6其他作用-3

1.2.4提取常用方法-3

 1.2.4.1酶解法-3

 1.2.4.2超聲水提法-3

 1.2.4.3 溶劑提取法-3

1.2.5 植物多糖的分離純化-3

 1.2.5.1 三維積法(Sevag)法-3

 1.2.5.2 三氟三氯乙烷法-3

 1.2.5.3 三氯醋酸法-4

 1.2.5.4 生物大分子純化-4

1.2.6.分析植物多糖常用方法-4

 1.2.6.1薄層層析-4

 1.2.6.2高效液相色譜法-4

 1.2.6.3氣相色譜法-4

 1.3研究意義及主要內容-4

1.3.1研究的意義-4

1.3.2實驗內容梗概-5

2 原料和方法-6

 2.1實驗原料、儀器-6

 2.2實驗儀器設備-6

 2.3實驗步驟-6

2.3.1生姜樣品的預先處理步驟-6

2.3.2生姜多糖的提取方法-6

 2.3.2.1工藝的制作步驟-6

 2.3.2.2操作過程中重要步驟-6

2.3.3測定生姜當中所含多糖的含量-7

2.3.4標準曲線的繪制-7

 2.3.4.1葡萄糖標準溶液配制的方法-7

 2.3.4.2 苯酚溶液的配制-7

 2.3.4.3標準曲線的繪制-7

2.3.5 單因素實驗設計方案-8

2.3.6響應曲面優化試驗設計-8

2.3.7 酸性纖維素酶提取生姜多糖優化試驗步驟-9

 2.3.7.1提取生姜粗多糖的工藝制作過程-9

 2.3.7.3 計算生姜粗多糖得率的公式-9

2.3.8 生姜多糖的純化-9

 2.3.8.1Sevag法脫蛋白質的工藝流程-9

 2.3.8.2 脫蛋白過程中的重要點-9

2.3.9 薄層色譜法測定生姜多糖-10

 2.3.9.1 操作過程-10

 2.3.9.2 水解酸的選擇-10

 2.3.9.3 展層系統的配制-10

 2.3.9.4 成分分析過程當中的重要點-10

3 結果與分析-12

 3.1單因素試驗條件的選擇-12

3.1.1加酶量對生姜多糖得率的影響-12

3.1.2 酶解時間對生姜多糖得率的影響-12

3.1.3 料液比對生姜多糖得率的影響-13

 3.2響應曲面優化試驗-14

3.2.1優化實驗數據處理與分析-14

3.2.3 最佳條件優化及其驗證結果-17

 3.3生姜多糖脫蛋白前后的純度-17

 3.4 生姜精多糖組成成分分析-18

3.4.1 水解酸的選擇-18

3.4.2展層系統的選擇-18

3.4.3展層系統綜合比較-21

結論-22

致謝-23

參考文獻-24