摘要:酶聯免疫法以其快速且簡便的特點，非常適合大量樣品的檢驗和篩選。本實驗選用了戊二醛法合成三聚氰胺的人工抗原，戊二醛作為連接蛋白質與蛋白質最常用的雙功能試劑，有兩個對稱的活性醛基，可分別與酶蛋白和免疫球蛋白上的游離氨基（酚基、咪唑基、巰基）以共價鍵的形式結合起來，利用這一特性，將牛血清蛋白（BSA）與三聚氰胺偶聯，合成人工抗原。將合成后的人工抗原用蛋白電泳法進行檢測，觀察是否偶聯成功。用合成后的人工抗原對小鼠進行免疫，通過間接酶聯免疫法（ELISA）測定效價。結果表明：1、蛋白電泳實驗顯示的偶聯物與載體蛋白進行對比，條帶明顯滯后說明偶聯效果較好。2、紫外掃描圖譜顯示偶聯物的特征吸收峰相比于載體蛋白的特征吸收峰發生明顯偏移，人工抗原與偶聯物偶聯良好。3、用合成好的人工抗原免疫小鼠，利用間接酶聯免疫法測效價，對比陰性小鼠，發現實驗小鼠血清中的抗體效價明顯,判定為陽性且效價明顯。

關鍵詞 三聚氰胺；酶聯免疫法；人工抗原；戊二醛法

目錄

摘要

Abstract

1 緒論-1

1.1三聚氰胺的選題背景-1

1.2三聚氰胺的性質及應用-1

1.2.1物理性質-1

1.2.2化學性質-1

1.2.3生產工藝與用途-1

1.2.4三聚氰胺偽蛋白原理-2

1.3三聚氰胺的毒理學性質-2

1.3.1食品中三聚氰胺的來源及其存在形式-2

1.3.2三聚氰胺致毒機理-2

1.3.3 三聚氰胺的代謝規律-3

1.4三聚氰胺檢測方法-3

1.5本課題的研究內容與目標-3

1.5.1研究意義-3

1.5.2內容與目標-4

2 材料與方法-5

2.1材料-5

2.1.1主要試劑-5

2.1.2主要儀器-6

2.1.3主要溶液-6

2.2方法-7

2.2.1人工抗原的合成-7

2.2.2人工抗原的鑒定-7

2.2.3多克隆抗體的制備-9

2.2.4抗血清效價的測定-9

3結果與分析-11

3.1蛋白電泳-11

3.2紫外掃描-12

3.3 ELISA測定-14

結論-15

致謝-16

參考文獻-17

附錄-19